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    復(fù)蘇凍存的細(xì)胞常見(jiàn)問(wèn)題處理方法

    發(fā)布時(shí)間: 2021-12-07  點(diǎn)擊次數(shù): 1326次

    本期跟大家分享復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí),常見(jiàn)的問(wèn)題處理方法,希望幫助大家平時(shí)在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)減少出錯(cuò)。


    1、收到的冷凍管瓶身破裂,瓶蓋有裂紋,或瓶蓋脫落的原因?

    冷凍管瓶蓋裂紋,或瓶身破裂,可能是因?yàn)椴僮髡邐A取冷凍管時(shí)用力不當(dāng),造成冷凍管裂損,建議使用止血鉗小心夾取。另冷凍管瓶蓋松動(dòng)或松脫,是因熱脹冷縮的物理現(xiàn)象,冷凍管有可能因此而造成細(xì)胞污染,故冷凍管于放入和取出液氮桶時(shí),均應(yīng)立刻將冷凍管再一次扭緊。


    2、冷凍管應(yīng)如何解凍?

    將冷凍管由液氮桶中取出解凍時(shí),必須注意安全,可佩戴防護(hù)眼鏡和手套預(yù)防冷凍管的爆裂。取出冷凍管后,須立即放入 37 ℃ 水浴環(huán)境中快速解凍,輕搖冷凍管使其在 1 分鐘內(nèi)全部融化,避免由于緩慢融化使水分滲入細(xì)胞內(nèi)形成胞內(nèi)再結(jié)晶對(duì)細(xì)胞造成損害。并注意水面不可超過(guò)冷凍管蓋沿,否則易發(fā)生污染情形。


    3、細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí),是否應(yīng)馬上去除 DMSO?

    現(xiàn)在大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室會(huì)在解凍細(xì)胞后加培養(yǎng)液將DMSO除去,但也有研究者認(rèn)為除少數(shù)特別注明對(duì) DMSO 敏感的細(xì)胞外,絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞),在解凍之后,可直接放入含有 10~15 ml 新鮮培養(yǎng)基的培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除 DMSO 即可,如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附的問(wèn)題。


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