欧美国产亚洲中英文字幕,国产欧美在线一区二区三区,亚洲 欧洲 无码 在线观看,三级午夜理伦三级

銷售熱線

19126518388
  • 公司動態(tài)NEWS

    您當(dāng)前的位置:首頁 > 公司動態(tài) > 探討免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染時要注意的一些基本事項(xiàng)

    探討免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染時要注意的一些基本事項(xiàng)

    發(fā)布時間: 2022-09-12  點(diǎn)擊次數(shù): 1138次
       理想的免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染法,應(yīng)該具有轉(zhuǎn)染效率高、細(xì)胞毒性小、重復(fù)性好、安全、簡單等優(yōu)點(diǎn)。病毒介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染技術(shù),是目前轉(zhuǎn)染效率高的方法,同時具有細(xì)胞毒性很低的優(yōu)勢。但病毒轉(zhuǎn)染方法的準(zhǔn)備程序復(fù)雜,常常對細(xì)胞類型有很強(qiáng)的選擇性,在一般實(shí)驗(yàn)室中很難普及。其它物理和化學(xué)介導(dǎo)的轉(zhuǎn)染方法則各有其特點(diǎn)。
      免疫細(xì)胞轉(zhuǎn)染時我們應(yīng)注意的一些要點(diǎn)如下:
      1.如為貼壁生長細(xì)胞,一般要求在轉(zhuǎn)染前一日,必須應(yīng)用胰酶處理成單細(xì)胞懸液,重新接種于培養(yǎng)皿或瓶,轉(zhuǎn)染當(dāng)日的細(xì)胞密度以70-90%(貼壁細(xì)胞)或2×106-4×106細(xì)胞/ml(懸浮細(xì)胞)為宜,在轉(zhuǎn)染前4h換一次新鮮培養(yǎng)液。
      2.用于轉(zhuǎn)染的質(zhì)粒DNA必須無蛋白質(zhì),無RNA和其他化學(xué)物質(zhì)的污染,OD260/280比值應(yīng)在1.8以上。
      3.培養(yǎng)基中的抗生素
      抗生素是影響轉(zhuǎn)染的培養(yǎng)基添加物。這些抗生素一般對于真核細(xì)胞無毒,但陽離子脂質(zhì)體試劑增加了細(xì)胞的通透性,使抗生素可以進(jìn)入細(xì)胞。這降低了細(xì)胞的活性,導(dǎo)致轉(zhuǎn)染效率降低。所以,在轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基中不能使用抗生素。
      對于穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,不要在選擇性培養(yǎng)基中使用青霉素和鏈霉素,因?yàn)檫@些抗生素是選擇性抗生素的競爭性抑制劑。另外,為了保證無血清培養(yǎng)基中細(xì)胞的健康生長,使用比含血清培養(yǎng)基更少的抗生素量。
      4.設(shè)置陽性對照和陰性對照。
      5.一般在轉(zhuǎn)染24-48h,靶基因即在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)。根據(jù)不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?4-48h后即可進(jìn)行靶基因表達(dá)的檢測實(shí)驗(yàn)。
      6.如若建立穩(wěn)定的細(xì)胞系,則可對靶細(xì)胞進(jìn)行篩選,根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的藥物,常用的真核表達(dá)基因載體的標(biāo)志物有潮霉素和新霉素等。
產(chǎn)品中心 Products
精品精品国产高清a毛片| 女同网站在线观看免费| 国产精品VIDEOS麻豆| 初尝黑人嗷嗷叫中文字幕| 日本伊人精品一区二区三区 | 成年女人喷潮大片免费播放| 国产香蕉国产精品偷在线观看| 九九热九九在这里才有的精品| 国产播放隔着超薄丝袜进入| 欧美熟妇精品视频 | 国产,日韩,欧美视频| 日韩中文无线码免费观看| 亚洲鲁丝片一区二区三区| 57PAO成人国产永久免费视频| 精品毛卡卡1卡2卡3麻豆| 国产精品毛片在线完整版SAB| 琪琪777午夜理论片在线观看播放| 欧美系列一区在线播放| 国产亚洲欧美日韩精品色狠二区| 日日澡夜夜澡人人高潮| 欧美亚洲中文字幕一区| 好爽好紧好大的视频国产| 美女自动脱了内衣视频| 亚洲欧美中文一区二区三区| 欧美日韩亚洲网站| 欧美日韩免费大片| 亚洲午夜久久久久久久久久久| 一区二区三区电影网| 欧美日韩免费观看| av综合网亚洲| 狠狠色做五月深爱婷婷| 无线乱码不卡一二三四破解版| 特黄特级毛片免费视频| 日韩亚洲欧美理论片| 国产亚洲欧美在线观看的| 87理论片高清免费理论片| 日韩精品一区二区三区四区| 99热免费| 制服在线无码专区| 1024cc香蕉在线观看看中文| 国产精品自在在线午夜免费|